Στη χημεία, τη βιολογία και την ιατρική, μια πιπέτα είναι ένα τυπικό εργαστηριακό όργανο που χρησιμοποιείται για την παροχή ενός προκαθορισμένου όγκου υγρού, συχνά ως διανομέας μέσων. Η επιτυχία των αποτελεσμάτων της πιπέτας εξαρτάται από την ακρίβεια που διαβάζετε τον όγκο της πιπέτας όταν εκτελείτε λεπτές μελέτες. Η χρήση ακριβών οργάνων υψηλής ποιότητας είναι ο καλύτερος τρόπος για να διασφαλίσετε ότι οι όγκοι των πιπέτων διαβάζονται σωστά. Καθώς οι εργαστηριακές απαιτήσεις για ακρίβεια και ακρίβεια συνεχίζουν να αυξάνονται, η κατανόηση και η τελειοποίηση των ιδανικών τεχνικών πιπέτας είναι κρίσιμης σημασίας.
Οι πιπέτες χρησιμοποιούνται στην επιστημονική έρευνα και απαιτούν υψηλή ακρίβεια για τη σωστή μέτρηση και μεταφορά μικρών ποσοτήτων υγρού.
Ωστόσο, η δυσλειτουργία του εξοπλισμού ή το σφάλμα χειριστή μπορεί να είναι η αιτία σφαλμάτων μέτρησης της πιπέτας. Οποιεσδήποτε αλλαγές στον διανεμόμενο όγκο μπορεί να έχουν αντίκτυπο στα αποτελέσματα και την αναπαραγωγιμότητα πειραμάτων, όπως αυτά του qPCR.
Παράγοντες που επηρεάζουν την ακρίβεια της πιπέτας:
Θερμοκρασία
Το ακριβές σιφώνιο επηρεάζεται σε μεγάλο βαθμό από τη θερμοκρασία. Η διαφορά θερμοκρασίας μεταξύ της συσκευής παροχής και του υγρού είναι ο παράγοντας που επηρεάζει περισσότερο. Τα ειδικά για κάθε περίπτωση αποτελέσματα της θερμικής διαστολής εμφανίζονται στο διάκενο αέρα (όγκος νεκρού αέρα) μεταξύ της επιφάνειας του υγρού και του εμβόλου. Μεταξύ άλλων συνεπειών, αυτό μπορεί να μειώσει ή να αυξήσει την ποσότητα του υγρού που αναρροφάται στο άκρο.
Πυκνότητα
Η ποσότητα του υγρού που αναρροφάται στο άκρο επηρεάζεται από την πυκνότητα (αναλογία μάζας/όγκου). Λιγότερο πυκνότερο υγρό αναρροφάται από μια παρόμοια διαδικασία χρησιμοποιώντας νερό. Για τα λιγότερο πυκνά υγρά, τα αποτελέσματα είναι αντίθετα. Αυτό προκαλείται από τον εύκαμπτο όγκο νεκρού αέρα και τη βαρύτητα της Γης. Η πυκνότητα του υγρού αλλάζει επίσης με τη θερμοκρασία. Τυπικά, η πυκνότητα ενός υγρού αλλάζει επίσης με τη θερμοκρασία. Στους 20 βαθμούς /68 βαθμούς F, το νερό έχει συνήθως πυκνότητα 0,998 kg/dm3, η αιθανόλη έχει πυκνότητα 0,79 kg/dm3 και το θειικό οξύ (95-98% h2SO4) έχει πυκνότητα 1,84 kg/dm3.
Υψηλός
Η ακρίβεια επηρεάζεται από την ατμοσφαιρική πίεση και το γεωγραφικό υψόμετρο. Όσο μεγαλύτερο είναι το υψόμετρο, τόσο χαμηλότερη είναι η πίεση του αέρα και τόσο χαμηλότερος ο συντελεστής μετατροπής.
Επιπλέον, τα σημεία βρασμού ορισμένων υγρών πέφτουν σημαντικά κοντά στη θερμοκρασία δωματίου, αυξάνοντας έτσι πολύ τις απώλειες εξάτμισης.
Εξάτμιση αντιδραστηρίου
Τα πολύ πτητικά αντιδραστήρια απορροφούν ατμούς, οι οποίοι εισέρχονται στο άκρο και αυξάνουν την εσωτερική πίεση. Επομένως, συμβαίνουν σφάλματα όταν το υγρό συμπιέζεται έξω λόγω αυξημένης πίεσης.
Επιλέχθηκε λανθασμένη λειτουργία πιπέτας
Κατά τη διάρκεια της μεταφοράς με πιπέτα, οι χειριστές λαμβάνουν συχνά τυχαίες ή υποκειμενικές αποφάσεις σχετικά με το εάν θα χρησιμοποιήσουν τη λειτουργία προς τα πίσω ή προς τα εμπρός. Ωστόσο, τα ιξώδη δείγματα θα πρέπει να είναι τα μόνα που χρησιμοποιούν αντίστροφη λειτουργία. Στην αντίστροφη λειτουργία, το έμβολο πιέζεται πλήρως (πέρα από την πρώτη στάση) για την αναρρόφηση του δείγματος και στη συνέχεια πιέζεται μόνο εν μέρει (στην πρώτη στάση) για να παραδοθεί το δείγμα. Επομένως, η χρήση της λειτουργίας προς τα εμπρός με παχύρρευστα ρευστά θα έχει ως αποτέλεσμα την υπο-παροχή, ενώ η χρήση της αντίστροφης λειτουργίας με υδατικά διαλύματα θα έχει ως αποτέλεσμα την υπερβολική παροχή.
Κλίση με πιπέτα
Η απώλεια δείγματος συμβαίνει όταν το άκρο της πιπέτας έρχεται σε επαφή με το τοίχωμα του δοχείου κατά τη διάρκεια της αναρρόφησης. Επιπρόσθετα, όταν μεταφέρετε με πιπέτα μικρούς όγκους, η απόσυρση της πιπέτας υπό γωνία μπορεί να προκαλέσει αλλαγές όγκου λόγω επιφανειακών τάσεων. Το τράβηγμα της πιπέτας απευθείας από το δοχείο μειώνει τα σφάλματα.